Équipe Biologie et Pathologie du Pancréas Endocrine (B2PE)

Responsable : Jamileh MOVASSAT (PR P7)

1. Physiologie:

  • in vivo: Manipulation des animaux (rats et souris), gavages, test de tolérance au glucose par voie intraveineuse, orale ou intrapéritonéale, clamps euglycémique et hyperinsulinémique,
  • Modèles animaux de pathologies: Pancréatectomie 90%, rat n0-STZ, rat GK
  • ex vivo : Mesure de la sécrétion d’hormones en incubation statique, mesure de la cinétique de sécrétion d’hormones par un système de périfusion et par pancréas isolé perfusé, mesures de flux métaboliques

2. Biologie cellulaire:

  • Isolement d’îlots pancréatiques de rats et souris,
  • Cultures organotypiques et cellulaires (entretien de lignées cellulaires & obtention de cultures primaires).
  • Cytométrie de flux (FACSAria II)
  • Techniques de fixation de tissus, de coupes au microtome et d’immunohistologie
  • Imagerie cellulaire:
    • Mesure de variations calciques (Microspectrofluorimétie)
    • Quantification de cellules et morphométrie (BIOCOM, HISTOLAB)
    • Microscopie à onde évanescente (TIRFM)
    • Microscopie confocale

3. Biologie moléculaire:

  • Extraction d’ADN génomique et plasmidique, d’ARN et de protéines (totales, nucléaires et cytosoliques).
  • PCR et RT-PCR, PCR en temps réel.
  • Préparation, amplification et purification de plasmides.
  • Techniques d’inhibition (par morpholinos) de gènes.
  • Transfections transitoires (electroporation, lipofection).

4. Biochimie:

  • Extraction de protéines (totales, nucléaires et cytosoliques).
  • Mesure interactions proteines-protéines par co-immunoprécipitation
  • Western Blot.
  • Dosages biochimiques d’hormones par technique RIA ou ELISA.